【研究内容】

研究细胞色素P450(Cyt P450)基因修饰的脐带间充质干细胞(UC-MSCs)联合环磷酰胺(CPA)对急性B淋巴细胞白血病的治疗作用。

【研究机构】

河北医科大学第二医院血液内科 北京贝来生物科技有限公司 

北京市亦创生物技术产业研究院干细胞与再生医学研究所

【研究人员】

王立华   李  欣 

刘广洋   苗  丽 

张晨亮   马   静 

刘拥军   米  一  

【发表时间及刊物】

2020年03期

ISSN：1674-6376

《药物评价研究》

【实验方法】

通过基因工程方法设计Cyt P450 2B6(CYP2B6)基因序列,采用慢病毒载体基因转染UC-MSCs,得到可高表达CYP2B6蛋白的CYP2B6-MSC种子细胞。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CYP2B6基因的表达评估转染效果;采用流式细胞术检测CYP2B6细胞表面标志物表达;采用体外诱导分化检测CYP2B6细胞分化能力。将CYP2B6-MSC与Nalm-6共培养,CCK8法和Annexin-V FITC/PI试剂盒检测UC-MSCs/CYP2B6-MSC联合CPA对Nalm-6细胞的增殖和凋亡的影响。

【结果】

qRT-PCR检测结果显示,CYP2B6-MSC可高表达CYP2B6蛋白,而hUC-MSC(对照组细胞)不表达CYP2B6蛋白;流式细胞术及诱导分化检测发现,CYP2B6基因修饰后的MSC流式表型及分化能力均未有显著变化;肿瘤杀伤实验发现,CYP2B6-MSC与Nalm-6细胞共培养,同时加入CPA后,与UC-MSC及未加CPA组比较,CYP2B6-MSC+CPA对Nalm-6细胞具有显著的增殖抑制及促凋亡作用(P<0.01)。

【结论】

CYP2B6基因修饰后的MSC联合CPA对Nalm-6具有显著的生长抑制和促凋亡作用。