【研究内容】

探讨人脐带间充质干细胞（hucMSCs）对人表皮角质形成细胞增殖与迁移的影响及其可能机制。

【研究人员】

章毅 陈侃俊 伍婷 张晗 祁成 孔凡瑞 陈亮 胡肖希 李品宙

【发表时间及刊物】

《中国医药生物技术》2020年第3期

【实验方法】

采用II型胶原酶消化法从新生儿脐带中分离制备hucMSCs，用流式细胞术鉴定 P3代hucMSCs表面标记抗原，用油红O染色、茜素红S染色和Masson染色进行间充质干细胞三向分化能力鉴定；以人表皮角质细胞系HaCaT为研究模型，在transwell上室接种P3代hucMSCs进行共培养，显微镜观察24、48和72h 时HaCaT的细胞形态，CCK8法检测细胞增殖状况，划痕法检测细胞12h和24h 迁移率，qRT-PCR法测定HaCaT细胞迁移、增殖相关生长因子KGF-2、FGFR-2、TGF-β1，以及细胞外基质蛋白Fibronectin、MMP-1和CollagenImRNA表达水平。

【结 果】

hucMSCs呈成纤维细胞样贴壁生长，其表面间充质干细胞标志性抗原CD105、CD90、CD73阳性表达率分别为98.35%、99.97%和99.94%，不表达CD45、CD34、CD14和CD19，在诱导培养16d后出现明显的成脂、成骨和成软骨细胞特性。hucMSCs共培养24、48和72h，HaCaT细胞存活率较对照组分别显著增加了（20.42±3.90）%（P=0.002）、（36.30±8.08）%（P=0.001）和（27.31 ±10.04）%（P=0.012），与形态学观察结果一致。划痕后继续培养12h，对照组、共培养组HaCaT的空白区域面积分别为（36354.19±1705.32）μm2、（29497.63±1286.49）μm2（P=0.045），培养24h，其空白区域面积分别减少为（13086.65±1695.85）μm2、（2895.69±224.32）μm2（P=0.014）。qRT-PCR结果显示，共培养处理24h后hucMSCs组KGF-2、TGF-β1基因表达分别上调为对照组的1.24倍和1.92倍；共培养48h后KGF-2、TGF-β1和FGFR-2分别上调2.01倍、2.26倍和1.34倍，细胞外基质蛋白Fibronectin转录水平显著上调为对照组的1.59倍，MMP-1降低至对照组的0.52倍。

【结 论】

hucMSCs能够显著促进 HaCaT细胞的增殖与迁移，这可能与hucMSCs调节 HaCaT增殖、迁移相关生长因子及细胞外基质蛋白的基因表达水平有关，提示 hucMSCs是有潜力的表皮创伤愈合种子细胞。