【研究内容】

探究骨髓间充质干细胞源性外泌体(BMSC-Exo)对髓核细胞凋亡的影响及其机制。

【研究机构】

 徐州医科大学附属淮安医院骨科

 南京医科大学康达学院附属涟水县人民医院骨科

【研究人员】

 肖权  徐长明  王永超  周全

【发表时间及刊物】

《东南国防医药》

2020年05期

【实验方法】

分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)，提取BMSC-Exo。分离培养髓核细胞，先取部分细胞分为内毒素组、内毒素+二硫氨基甲酸肽吡咯烷(PDTC)组，分别加入内毒素500μg/mL、内毒素500μg/mL+PDTC 5μmol/L孵育24 h。流式细胞仪检测细胞凋亡率。另取细胞分为对照组、退变组、外泌体组、佛波醇酯组，分别采用基础培养基，内毒素500μg/mL刺激，内毒素和外泌体20μg刺激，内毒素、外泌体和佛波醇酯50μg/mL刺激培养24 h。流式细胞仪检测细胞凋亡率；Western blot检测Cleaved Caspase-3、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)表达情况。

【结 果】

成功分离培养BMSCs并提取BMSC-Exo。内毒素+PDTC组细胞凋亡率[(1155±086)%]较内毒素组[(2863±286)%]降低(t=9909，P=0001)。对照组凋亡率[(905±161)%]较退变组[(2948±283)%]显著升高(t=-10874，P=0000)；与退变组相比，外泌体组下降至(1508±165)%，差异有统计学意义(t=7620，P=0002)；与外泌体组相比，佛波醇酯组升高至(2541±138)%，差异有统计学意义(t=-8323，P=0001)。与对照组比较，退变组p-IκBα蛋白表达升高(t=-10575，P=0000)，Cleaved Caspase-3蛋白表达升高(t=-8506，P=0001)；与退变组比较，外泌体组p-IκBα蛋白表达降低(t=10052，P=0001)，Cleaved Caspase-3蛋白表达降低(t=7419，P=0002)；与外泌体组比较，佛波醇酯组p-IκBα蛋白表达升高(t=-12125，P=0000)，Cleaved Caspase-3蛋白表达升高(t=-8421，P=0001)。

【结 论】

BMSC-Exo可抑制内毒素诱导的髓核细胞凋亡，其作用可能是通过抑制NF-κB信号通路实现的。